Técnicas

  • Transgénesis en ratón. CRISPR y técnicas clásicas.
  • Microinyección en embriones de ratón post-implantación.
  • Electroporación de embriones con CRISPR
  • Microinyección de embriones post-implantacionales (Cre-Recombinasa)
  • Manejo de tetraploides (obtención, agregaciones y microinyección)
  • Técnicas de Enucleación/Electrofusión con carioplastos y citoplastos para la generación de líneas de ratón conplásticas
  • Cultivo de embriones de ratón pre-implantación
  • Embriología experimental de aves
  • Genómica comparada: análisis bioinformático y evolutivo de genomas
  • Técnicas generales de Biología Molecular
  • Técnicas de Criopreservación de germoplasma: embriones y espermatozoides
  • Ovariectomía
  • Trasplante ovárico
  • Técnicas de inseminación artificial: intrabursal, transoviductal e intrauterina
  • Técnicas de Criopreservación de germoplasma de Pez Cebra: espermatozoides.

Equipamiento

Además de otros equipos, se describen los aparatos más representativos de la Unidad de Transgénesis:

a) En el Laboratorio de Micromanipulación/Microinyección:

  • 1 Incubador de CO2 Marca NUAIRE (US AUTOFLOW CO2 Water Jacketed Incubator) Modelo UN-4750
  • 1 Estirador automático de capilares de vidrio (Flaming/Brown Type Micropipette Puller), Marca Sutter Modelo P-97 para fabricación de microagujas
  • 1 Microforja tipo DeFonbrune Marca “The GlasswoRx” Modelo ICSI F-1200-2 con sistema de microscopio compuesto Olympus con oculares 10X (retícula micrométrica/goniométrica F-5 en uno de ellos) y objetivos de 4X y 10X
  • 2 Microscopios estereoscópicos con base diascópica Marca Leica: uno de ellos Modelo MZ-10F con fuente de fluorescencia incorporada y filtros para GFP2, TXR y UV, así como con cámara digital y monitor TFT para covisualización y documentación científica, y sistema informático de soporte conectado a la Intranet del centro, y el otro, Modelo MZ-12,5
  • 1 Microscopio estereoscópico Marca Nikon Modelo SMZ1000, con base diascópica
  • 2 Fuentes de iluminación con luz fría incidente Marca LEICA Modelo CLS150X con dos fibras ópticas semirrígidas (Incident light AL/S 2X450mm/750 de 4.5 mm diámetro) y con fibra flexible de dos brazos, SH2E 4.5mm/600mm
  • 2 Microscopios ópticos invertidos Marca ZEISS Modelo AxiObserver con óptica Nomarski, ambos con cámara digital y monitor TFT para covisualización y documentación científica, y sistema informático de soporte conectado a la Intranet del centro. Presentan oculares 10X y objetivos 5X, 10X , 20X (DIC) y 40X (DIC) (DIC, Differential Interferential Contrast)
  • 1 Microscopios óptico invertido Marca LEICA Modelo DMIREZ, con óptica Nomarski, con oculares 10X y objetivos 5X, 10X, 20X (DIC) y 40X (DIC) (DIC, Differential Interferential Contrast)
  • 6 Micromanipuladores motorizados (2 por cada microscopio) Marca Eppendorf Modelo TransferMan-NK2
  • 1 Microinyector manual Marca Eppendorf Modelo CellTram-Air
  • 2 Microinyectores hidráulicos manuales con engranaje Marca Eppendorf Modelo CellTram-Vario
  • 3 Microinyectores hidráulicos marca Eppendorf Modelo CellTram-Oil
  • 3 Microinyectores neumáticos digitales, uno para cada microscopio, Marca Eppendorf Modelo FemtoJet
  • 2 Microperforadores piezoléctricos, Marca PrimeTech Modelo PMM-150-FU
  • 3 mesas antivibración Marca TMC Serie 63-500 (dimensiones 750x1200 mm) con soportes activos donde van montados los equipos de microinyección
  • 1 Osmómetro Marca Advanced Instruments, Inc. Modelo 3320
  • 1 Láser para micromanipulación de embriones. Modelo XYClone marca Hamilton Thorne
  • 1 Electroporador

b) En el Laboratorio de Transferencias Embrionarias:

  • 1 Incubador de CO2 Marca REVCO Modelo MRI3000S-9-VBA
  • 1 Placa calefactora digital Marca BUNSEN Modelo 1530 para la calefacción a 37ºC de la jaula conteniendo las hembras de ratón que han sido intervenidas quirúrgicamente para las transferencias de embriones
  • 2 Microscopios estereoscópicos Marca Leica Modelos MZ-12,5 (uno de ellos con cámara digital y monitor TFT para covisualización y documentación científica, y sistema informático de soporte)
  • 2 esterilizadores de bolas de vidrio Marca KELLER Modelo Steri-250 para esterilización del instrumental quirúrgico
  • 2 Fuentes de iluminación con luz fría incidente Marca LEICA Modelo CLS150X con dos fibras ópticas semirrígidas (Incident light AL/S 2X450mm/750 de 4.5 mm diámetro) y con fibra flexible de dos brazos, SH2E 4.5mm/600mm
  • 2 Controladores de temperatura (F.S.T. TR-200), con sonda rectal y almohadilla calefactora para evitar la hipotermia de los ratones que son intervenidos quirúrgicamente